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腋區(qū)解剖實驗報告

時間:2025-01-25 08:03:12 報告范文 我要投稿
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腋區(qū)解剖實驗報告

  在現(xiàn)實生活中,報告與我們的生活緊密相連,報告具有成文事后性的特點。那么大家知道標(biāo)準正式的報告格式嗎?以下是小編收集整理的腋區(qū)解剖實驗報告,僅供參考,歡迎大家閱讀。

腋區(qū)解剖實驗報告

  蛙類坐骨神經(jīng)–腓腸肌標(biāo)本制備、不同頻率刺激對肌肉收縮的影響

  一、目的要求

  1、掌握蛙類雙毀髓的試驗方法;

  2、掌握坐骨神經(jīng)—腓腸肌標(biāo)本標(biāo)本的制作方法;

  3、觀察不同刺激頻率對骨骼肌收縮形式的影響。

  二、基本原理

  蛙類動物的某些基本活動,如神經(jīng)的生物電活動、肌肉收縮等與哺乳動物相似。其離體組時所需的生活條件比較簡單,易于控制和掌握,而且動物來源豐富,因此在生理實驗中常用蛙類的坐骨神經(jīng)—腓腸肌標(biāo)本和坐骨神經(jīng)標(biāo)本來觀察組織的興奮性、刺激與反應(yīng)的規(guī)律以及骨骼肌收縮的特點等。肌肉受到一次閾上刺激而產(chǎn)生的一次收縮為單收縮,其過程可分為三個時相,即潛伏期、縮短期和舒張期。肌肉受到連續(xù)的閾上刺激時,如果刺激間隔小于單收縮的過程,相鄰兩單收縮的時相會出現(xiàn)融合,表現(xiàn)為強直收縮現(xiàn)象。如果表現(xiàn)為每次收縮的開始發(fā)生在上次收縮的縮短期,稱完全強直收縮,如果表現(xiàn)為每次收縮的開始發(fā)生在上次收縮的舒張期,稱不完全強直收縮。使用生物信號采集處理系統(tǒng),可以觀察到腓腸肌收縮的情況。

  三、實驗材料

  實驗動物:健康青蛙一只;

  實驗器材和藥品:蛙類手術(shù)器械一套(粗剪刀一把,組織剪一把,眼科剪一把,鑷子一把,探針一根、玻璃分針2把,蛙釘4個、培養(yǎng)皿一個,蛙板一個、滴管一個、棉線若干),張力換能器,肌槽,刺激電極,鐵架臺,生物信號采集處理系統(tǒng),微機,任氏劑。

  四、實驗步驟

  搗毀蟾蜍腦脊髓:取蟾蜍一只,用自來水沖洗干凈。左手握蛙,用食指下壓頭部前端,拇指按壓背部,使頭前俯。中指與無名指夾其前肢,無名指與小指夾其后肢,使整個軀干做最大屈曲。把探針自枕骨大孔處垂直刺入,到達椎管,即將探針改變方向刺入顱腔,向各側(cè)不斷攪動,徹底搗毀腦組織;再將探針原路退出,刺向尾側(cè),捻動探針使其逐漸刺入整個椎管內(nèi),完全徹底搗毀脊髓。脊髓破壞完全的標(biāo)志是:下頜呼吸運動消失,反射消失,四肢松軟。

  剪除軀干上部和內(nèi)臟,去皮,制備下肢標(biāo)本:用粗剪刀在骶髂關(guān)節(jié)前1厘米處剪斷脊柱,握住蟾蜍下肢,沿軀干兩側(cè)(避開坐骨神經(jīng))剪開腹壁。此時軀干上部及內(nèi)臟即全部下垂。剪除全部軀干及內(nèi)臟組織。剪去肛周皮膚;用圓頭鑷子夾住脊柱,注意不要碰到坐骨神經(jīng),捏住皮膚邊緣,逐步向下牽拉剝離皮膚。將全部皮膚剝除后,把標(biāo)本置于盛有任氏液的培養(yǎng)皿中。

  洗凈雙手和用過的全部手術(shù)器械。

  分離兩下肢:避開坐骨神經(jīng),用粗剪刀從背側(cè)剪去骶骨,然后沿中線將脊柱剪成左右兩半,再從恥骨聯(lián)合中央剪開,將已分離的標(biāo)本浸入盛有任氏液的培養(yǎng)皿中。

  取出一下肢,用蛙釘固定于蛙板上,固定時要注意,坐骨神經(jīng)和腓腸肌朝上。先用玻璃分針沿脊柱側(cè)游離坐骨神經(jīng)腹腔部,然后循股二頭肌和半膜肌之間的坐骨神經(jīng)溝,縱向分離暴露坐骨神經(jīng)之大腿部分直至腘窩,在分離過程中,把神經(jīng)周圍的結(jié)締組織去除干凈,并把神經(jīng)的細小分支剪斷,但要注意不要用金屬器械碰觸神經(jīng),也不要對神經(jīng)過度牽拉。實驗期間應(yīng)不斷滴加任氏液使神經(jīng)保持濕潤。

  用玻璃分針游離腓腸肌,并在下面穿線,在跟腱處打結(jié)。在結(jié)扎線的下方剪斷跟腱,在膝關(guān)節(jié)處把除腓腸肌外的小腿其他部分剪除。注意保持完整的腓腸肌。

  用棉線在靠近脊柱的位置結(jié)扎坐骨神經(jīng),并在結(jié)扎線的上方剪斷神經(jīng),用眼科剪剪斷坐骨神經(jīng)的全部分

  支。從腘窩處開始剪掉大腿所有的肉,盡量把股骨刮干凈,在膝關(guān)節(jié)上至少1cm處剪去上段股骨。將標(biāo)本浸入任氏劑的培養(yǎng)皿中。

  實驗裝置與儀器連接:1、將標(biāo)本股骨殘端固定在肌槽上的小孔內(nèi);2、將結(jié)扎腓腸肌肌腱的棉線與張力換能器連接,調(diào)節(jié)棉線的松緊,要與桌面垂直;3、將神經(jīng)置于肌槽的刺激電極上,用任氏劑保持標(biāo)本濕潤;4、刺激電極插入微機上的刺激輸入孔;5、張力換能器與微機相應(yīng)通道相連。

  打開電腦,進入生物信號采集處理系統(tǒng),在菜單欄選擇“實驗項目”》“神經(jīng)肌肉”》“刺激強度與反應(yīng)的關(guān)系實驗?zāi)K”點擊開始,調(diào)節(jié)刺激參數(shù),使頻率自動逐漸遞增,串間隔為2、連續(xù)記錄不同頻率時的肌肉收縮曲線。

  五、結(jié)果與分析

  不同頻率刺激對肌肉收縮的影響:串間隔為2,頻率增量為1時的張力變化(如圖)可見單收縮、不完全強直收縮、完全強直收縮。

  分析:刺激強度到達閾刺激時腓腸肌開始收縮,在最大刺激收縮力前隨刺激強度增大而增大,到達最大刺激強度后,收縮力不發(fā)生明顯改變;在最大刺激強度條件下,某較小頻率使腓腸肌發(fā)生單收縮(如圖中第一次刺激),頻率增大到,單收縮變?yōu)椴煌耆珡娭笔湛s(如圖中第26次刺激),頻率繼續(xù)增大,不完全強直收縮變?yōu)橥耆珡娭剖湛s(如圖中第7、8次刺激)。不同的腓腸肌其閾刺激,最大刺激均存在差異;其單收縮,不完全強直收縮和完全強直收縮所要頻率也不盡相同。

  六、實驗總結(jié)

  本次試驗嚴格按照操作步驟進行,所得實驗結(jié)果較為理想,很容易觀察到腓腸肌的單收縮、不完全強直收縮、完全強直收縮現(xiàn)象。在實驗的過程中,制備坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本是最繁瑣的步驟,也是實驗成功的關(guān)鍵所在,期間,我們進行的比較緩慢,生怕弄錯了哪一步,一步步想原理、回憶老師是怎么說的,所幸的是我們最終成功了,得到了較好的結(jié)果,在這次的不斷嘗試和思考中,很好地鍛煉了我們的動手能力和思維能力。

  離體蛙心灌流

  一、【目的要求】

  1、學(xué)習(xí)斯氏離體蛙心灌流法;

  2、了解心肌的生理特性;

  3、觀察Na+,K+,Ca2+及腎上腺素(Adr),乙酰膽堿(ACh)等對離體心臟活動的影響。

  二、【原理】

  將離體蛙心(失去神經(jīng)支配的蛙心)保持在適宜的環(huán)境中,在一定的時間內(nèi)仍然能夠保持節(jié)律性收縮,心臟正常的節(jié)律性活動需要一個適宜的理化環(huán)境,離體心臟也是如此,離體心臟脫離了機體的神經(jīng)支配和全身體液因素的直接影響,可以通過改變灌流液的某些成分,觀察其對心臟活動的作用。心肌細胞的自律性、興奮性、傳導(dǎo)性及收縮性,都與鈉、鉀及鈣等離子有關(guān)。血鉀濃度過高時(高于7.9mmol/L),心臟興奮性、自律性、傳導(dǎo)性及收縮性都下降,表現(xiàn)為收縮力減弱、心動過緩和傳導(dǎo)阻滯,嚴重時心臟可停搏于舒張期。血鈣濃度升高時,心臟收縮力增強,過高可使心室停搏于收縮期。血鈣濃度降低,心肌收縮力減弱。血中鈉離子濃度的輕微變化,對心肌影響不明顯,只有發(fā)生明顯變化時,才會影響心肌的生理特性。腎上腺素可使心率加快、傳導(dǎo)加快及心肌收縮力增強,乙酰膽堿則與腎上腺素的作用相反。

  三、【實驗儀器】

  青蛙、常用手術(shù)器械、蛙板(或蠟盤)、蛙心夾、計算機采集系統(tǒng)、張力傳感器、支架、雙凹夾、雙針形露絲刺激電極、滴管、培養(yǎng)皿(或小燒杯)、紗布、棉線、橡皮泥、任氏液。蛙心套管(斯氏套管或八木氏套管)、套管夾、0.65%NaCl、5%NaCI.2%CaCl2.1%KCl.1:5 000腎上腺素、1:10 000乙酰肌堿、300U/mL肝素。

  四、【方法與步驟】

  1、斯氏蛙心插管法

  (1)一只青蛙,雙毀髓后背位置于蠟盤中,按前面的方法暴露心臟。仔細識別心臟周圍的大血管(見右圖)。在左主動脈下方穿一線,于動脈圓錐處結(jié)扎(動物個體小時,結(jié)扎位置可靠上些)。再從左右兩主動脈下方穿一線,并打一活結(jié)備用。左手提起主動脈上的結(jié)扎線,右手用眼科剪在結(jié)扎線下方、沿向心方向?qū)用}上壁剪一斜口。選擇大小適宜的蛙心套管,然后將盛有少量(套管內(nèi)2~3 cm高度)任氏液(內(nèi)加入一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管,山開口處插入動脈圓錐(見右圖)。當(dāng)套管尖端到達動脈圓錐基部時,應(yīng)將套管稍稍后退,使尖端向動脈圓錐的背部后下方及心尖方向推進,經(jīng)主動脈瓣插入心室腔內(nèi)(于心室收縮時插入,但不可插得過深,以免心室壁堵住套管下口)。此時可見套管中血液沖人套管,并使液面隨心臟搏動而亡下移動,表明操作成功(否則需退回并重新插入)。用滴管吸去套管中的血液,更換新鮮任氏液。穩(wěn)定住套管后,輕輕提起備用線,將左、右主動脈連同插入的套管用雙結(jié)扎緊(不得漏液),再將結(jié)線固定在套管的小玻璃鉤上,然后剪斷結(jié)扎線上方的血管。輕輕提起套管和心臟,看清靜脈竇的位置,于靜脈竇下方剪斷有牽連的組織,僅保留靜脈竇與心臟的聯(lián)系,使心臟離體(切勿損傷靜脈竇)。用任氏液反復(fù)沖洗心室內(nèi)余血,使套管內(nèi)灌流液不再有殘留血液。保持套管內(nèi)液面高度一致(1.5~2 cm),即可進行實驗。

  (2)將插好離體心臟的套管固定在支架上,用蛙心夾夾住少許心尖部肌肉(不可夾得過多,以免因夾破心室而漏液)。再將蛙心夾上的系線繞過一個滑輪與張力傳感器相連(如右圖)。注意:勿使灌流液滴到傳感器上。調(diào)節(jié)顯示器上心臟收縮曲線的幅度適中。

  2、實驗觀察

  (1)記錄正常心搏曲線

  (2)改用0、65%NaCI溶液灌流,并作好加藥標(biāo)記,觀察心搏變化。待曲線氏插管裝置出現(xiàn)明顯變化時,立即吸去套管中的灌流液,同時做好沖洗標(biāo)記,并用新鮮任氏液清洗2—3次,待心搏恢復(fù)正常。注意:換液時切勿碰套管,以免影響描記曲線的基線,同時保持灌流液面一致(以下同)。觀察可得,NaCI溶液會阻遏心臟搏動。

  (3)迅速用新鮮任氏液清洗2~3次,待心搏恢復(fù)正常。向套管內(nèi)加入1~3滴2%CaCI:溶液,觀察并記錄心搏曲線的變化。當(dāng)出現(xiàn)明顯變化時,立即更換任氏液,待心搏恢復(fù)正常(如果恢復(fù)遲緩,可多次沖洗)。

  (4)同法向套管中加1—2滴1%KCl溶液,記錄心搏曲線的變化。當(dāng)心搏曲線變化時,同法更換灌流液,待心搏恢復(fù)正常。

  (5)同法記錄套管中加入l~2滴的腎上腺素溶液(1:10 000)后心搏曲線的變化。

  (6)同法記錄套管中加入1—2滴乙酰膽堿溶液(1:10 000)后心搏曲線的變化。

  五、【實驗結(jié)果與原因分析】

  曲線的幅度————收縮的程度

  曲線的密度————心率

  曲線的基線————舒張的程度

  1、正常收縮曲線圖

  分析:

  2、滴加含鈉離子溶液圖

  分析:滴加Na離子溶液后,心跳減弱,這種現(xiàn)象出現(xiàn)的原因是由于灌注液中缺乏Ca2+,當(dāng)Na+明顯增高時,膜內(nèi)外鈉離子的濃度梯度增大,因此,細胞Na離子內(nèi)流加快,去極速

  2+度和幅度均增加,導(dǎo)致傳導(dǎo)性和自律性增高。同時,Na離子內(nèi)流的增多促進細胞內(nèi)Ca的

  2+外運使細胞內(nèi)Ca濃度降低,因此,心肌收縮能力減弱。

  3、滴加2%CaCl溶液

  分析:細胞外Ca2+在細胞膜上對Na+內(nèi)流有競爭性抑制作用,稱為膜屏障作用。[Ca2+]增高時,Na+內(nèi)流受抑制,細胞0期除極速度與幅度減小,使興奮性及傳導(dǎo)性均降低。[Ca2+]增高使Ca2+內(nèi)流增多,因此慢反應(yīng)細胞0期去極化加快加強,傳導(dǎo)性增高,而快反應(yīng)細胞平臺期縮短,有效不應(yīng)期縮短,復(fù)極加速。Ca2+內(nèi)流增多,使心肌收縮能力增強。[Ca2+]降低時,所引起的變化與高鈣時相反。因此加入CaCl2后,心率減少、振幅減少,基線上移。

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